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HPLC 故障排除

开始故障排除之前,务必遵守实验室安全操作规范。了解使用的任何溶剂的化学和物理性质,并在伸手可及的位置放
置适当的材料安全性数据表 (MSDS)。开始故障排除前,应先关闭所有使用电源的仪器并拔下其插头。另应佩戴护
目镜。
下表列出了常见的 HPLC 问题、可能原因以及解决方法,供您快速参考。

故障   原因及操作
压力问题 压力低 流动相粘度低,了解流动相经典压力。
    活塞或者密封垫泄露,更换。
    系统溶剂残留,冲洗系统。
    系统有空气,脱气。
    流动相抽空,补充流动相。
  压力高 流动相粘度大,了解流动相经典压力,必要情况下更换流动相。
    流速设置太大,降低流速。
    筛板堵塞,清洗,必要情况下反冲。
    管路堵塞,清洗管路。
    保护柱堵塞,更换保护柱或者柱芯。
    盐析出,使用恰当流动相,冲洗色谱柱。
    柱温太低,调高柱温。
    检测器堵塞,清洗流通池。
  压力不稳 梯度洗脱,属于正常。
    脱气不充分,流动相脱气。
谱图问题 基线波动 柱温不稳,固定柱温。
    系统平衡不够充分,充分平衡。
    流动相混合不均匀。
    色谱柱或者保护柱污染。
    系统泄漏。排除系统漏液情况。
    灯能量不够,产生波动,更换新的氘灯。
  基线噪音(规则) 脱气不充分
    漏液
    流动相混合不充分。
  基线噪音(不规则) 系统漏液。
    流动相溶剂不相容。
    流动相混合不均匀。
    检测器内有气泡。
  宽峰 流速太低。
    流动相配比不合适。
    漏液
    色谱柱柱效太低,更换更好的色谱柱。
    柱温过低。
    峰未分开。
    色谱柱入口处塌陷。
    进样量过大。
  峰分叉 保护柱污染。
    色谱柱柱头污染。
    样品溶剂不溶于流动相。
  倒峰 流动相溶剂不纯。
    用流动相做样品溶剂
    减小进样体积
  平头峰 进样量过载,减小进样量。
  峰拖尾 柱头筛板堵塞。
    色谱柱塌陷。
    有其他峰干扰。更换柱效更高色谱柱或者改变方法。
    PH选择错误,调整为其他PH,碱性化合物低PH流动相更合适。
    样品与硅醇基发生作用,加入离子对试剂。
  峰前延 色谱柱损坏(脏或者塌陷)。
    柱温过低。
    样品溶剂选择不当。
  起始峰变形 样品溶剂换为流动相
    样品溶剂换成较弱的溶剂
  多余的峰 样品有其他成分存在。
    上一次进样未跑出的成分峰
  峰位不稳 温控不稳
    流动相变化,可能为比例阀问题,或者放置流动相蒸发、反应。
    色谱柱平衡不充分。
  分离度降低 流动相变质,重新配置流动相。
    色谱柱或者保护柱堵塞。
    色谱柱柱效下降。

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